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標 題Re: [問題] 關於western的電泳小問題
發信站I-Shou University BBS (Thu Mar 23 23:44:50 2006)
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※ 引述《[email protected] (想去南極跟企鵝玩!)》之銘言：
> 其實已經是大問題了
> 因為實驗需求 所以跑western
> 跑了三次 但是總是遇到一些瓶頸
> 不知道要怎麼解決 所以上來尋求一些意見
> 我所使用的是全新的bio-rad的電泳和濕式transfer設備
> 但是當我在跑電泳的時候
> 所花的時間很長 5-6小時
> 這跟我以前在做western跑電泳的情形差很多
> 本來以為是Tris buffer或是running buffer的問題
> 因為這些是自己泡的
> 結果這次全部重泡一次的
> 一開始有跑得比較順
> 但是跑到中間又開始跑不動了
> 而且這幾次我發現我的running buffer會從電泳槽會有些漏出來
> （從外槽跟內槽連接的縫隙 不是外槽破掉 我check過了)
> 所以桌子會濕濕的
> 我在猜我的電泳會比較跑不動是不是跟那個running buffer漏出來有關呢
> 我跑的是brain tissue sample
> 利用的SDS-page 為10% resolving gel 5% stacking gel
我做過hofer的,後來做bio-rad
跑不動,我覺得很奇怪,結果
0m1;1m玻璃片裝反了0m
orz 因為hofer跟bio-rad的玻璃片裝法是相反的
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