作者grandia (Matchbox twenty!!錄機Be)
看板Biotech
標題Re: [問題] TRIzol可同時抽DNA, RNA, protein!?
時間Wed Aug 2 10:33:32 2006
※ 引述《aggaci (挖拍狼喔!!)》之銘言：
: ※ 引述《cycdodo (嘟嘟兒)》之銘言：
: : 最近實驗室新買了TRIzol
: : protocol說這kit可同時抽RNA DNA protein
: : 因為我的實驗要抽RNA及protein
: : 所以想說也許可以"養一盤細胞,就得到RNA及protein"
: : (不然每次都要養很多 很麻煩 又浪費@@")
: : 我之前都是抽total cell lysate
: : 想請問大家
: : 有沒有人用過TRIzol同時將RNA及protein抽出來?
: : 又效果如何呢?
: : 並且 total cell lysate跟TRIzol抽出來的protein一樣嗎?
: : 感謝大家^^
: trizol理論上可以啦
: 我試過..但是protein pellet到最後整個aggregate在一起
: 連G-HCl都沒辦法溶解....
: 所以放棄........
: DNA我就不知道了....
: 所以trizol還是用來抽RNA就好...
我有查到paper說 可以用Urea-CHAPS去溶解 但是 我試了溶解效率還是很差
它說要室溫作用兩小時 我放了很久 pellet還是沒有溶掉
我開始懷疑 protein可以在室溫下待這麼久嗎?
反正 效率差的要死
不知道大家有啥更好的方法 我的sample很少量 所以非得RNA protein同時收
唉 我想打電話去問invitrogen技術部
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◆ From: 140.129.78.20
1F：推 ccfccf:不用想太多了... 花錢買kit就搞定了 :) 08/02 13:51
2F：→ ccfccf:TRIzol的出來protein quality與quantity相當差 !!! 08/02 13:51
3F：推 jbking:trizol加上適量的protease inhibitor應該產量也不差吧 08/06 00:47
4F：推 Doyce:真的不好用... 08/08 21:07