作者hongdow (紅豆)
看板Biotech
標題[求救]請問,為什麼使用lysis buffer要在冰上阿???常溫不行嗎??
時間Thu Feb 21 16:38:05 2008
想請問各位前輩幾個問題,拜託了Orz
疑問一, 為什麼使用Lysis buffer 要在冰上或4度下與細胞作用阿?常溫下不能嗎?
疑問二,那麼大家都把配好的lysis buffer儲存在4度C冰箱嗎?(我是這麼做的)
疑問三,關於板上有很多前輩都是自己配lysis buffer的,但在配完後,怎麼知道自己
配的lysisi buffer 準確性跟效果到底算好還是不好呢,畢竟跟買的kit相比較
下,kit會貴一定有它的效果在,所以很懷疑自己配出來的真的能用嗎???
以上幾個問題拜託各位學長,學姐,同學替我解答,非常謝謝您^^
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◆ From: 140.118.6.103
1F：推 liuse:Q1:應該是跟protease有關 02/21 16:40
2F：→ liuse:Q2:我覺得放室溫也可以(反正protease inhibitor是現加) 02/21 16:40
3F：→ liuse:不過反正lyse cell時要低溫 那乾脆buffer放冰箱 02/21 16:41
4F：→ liuse:Q3:很簡單，你lyse完離心 取pellet和sup去跑PAGE做WB就知道 02/21 16:42
5F：推 bluecsky:lysis buffer又不是很難配的東西..kit也不是貴在這裡 02/21 17:41
6F：→ bluecsky:要是kit貴在這裡的話他一定不會公開配方給你的.. 02/21 17:41
7F：→ bluecsky:因為你原本是nature的狀態..你的protease也還是有功能 02/21 17:42
8F：→ bluecsky:所以盡量4度c操作..至於儲存..就方便阿..可以直接拿就用 02/21 17:42
9F：→ bluecsky:還有大多kit的lysis buffer都公開配方還幫你算好好的 02/21 17:43
10F：→ bluecsky:不會有不能用的問題= =.. 02/21 17:44
11F：推 machin:買lysis buffer的lab 可能沒有錢買那麼多試劑吧!或許不是常 02/21 18:23
12F：→ machin:做的實驗 只做幾次OK就好..當然也有可能是實驗室太有錢了:p 02/21 18:24
13F：→ machin:如果實驗設計沒問題 buffer也沒配錯 還沒看過跑不出來的! 02/21 18:25