作者lothc (真的是太吸引人了)
看板Biotech
標題[求救] 有關上flow前的酒精固定
時間Tue Mar 11 23:45:17 2008
大家好
我想請問一下有在做flow的版友們
當用70%酒精固定cell時
是不是很不容易把cell均質呢??
我目前的做法是在細胞wash後離心取pellet時
留下約200~250ul的PBS不吸光
接著votex把pellet均質後
再加入95%酒精700ul
這樣子final剛好是70%
同時cell也比較容易均質
不過還是多多少少會看到一些沒有打散掉的pellet ~"~
請問一下這個狀況是正常的嗎??
以及我的這個固定的手法合不合理呢??
謝謝各位
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 192.192.90.33
1F：推 tsubasawolfy:之後去除酒精還是要離心變pellet... 03/12 08:03
2F：推 tsubasawolfy:忘了說 我是完全抽乾後再加入PBS 然後pipetting稍 03/12 08:06
3F：→ tsubasawolfy:微沖散 再把EtOH一小滴一小滴慢慢低入後在用pipette 03/12 08:09
4F：→ tsubasawolfy:混合均勻 沒有殘留pellet的問題- -a 細胞數大概80萬 03/12 08:10
5F：→ tsubasawolfy:(反正跑flow細胞不用太多 太多沒打散還會黏管) 03/12 08:11
6F：推 scs0214:我的作法也是跟原PO類似 我認為這樣的效果比較好 而且加酒 03/12 10:00
7F：→ scs0214:必須同時緩慢的vortex sample tube 03/12 10:02
8F：→ lothc:了解了 我會再加入酒精的時候同時vortex 謝謝樓上兩位喔^^ 03/12 12:16