※ 引述《Corsairs (北七)》之銘言： : 標題: [實驗] HPLC分析 : 時間: Mon Nov 8 15:18:34 2010 (部分恕刪) : 推 Silience:你的HPLC是用什麼方法來偵測的?? 11/08 15:51 : → Corsairs:UV- 試很久才找到適合的波長 QQ 11/08 15:55 : 推 Silience:那有可能你要的產物UV不強...可是雜質的訊號很強的話 11/08 16:10 : → Silience:自然就會有你所說的現象了。 11/08 16:10 : → Silience:尤其在沒有純化過的情況下的話，那是非常正常的。 11/08 16:11 : : 我這樣跟老師說過, 可是就算UV吸收不強 雜質訊號強 : 那產物跟內標物的比例應該不受雜質影響吧?? 首先我是先假設你沒有判斷錯誤產物的peak(NMR, HPLC)， 但是基本上...你說的問題不是沒有可能， 因為有些產物本來UV吸收就比較弱，所以就算你增加濃度 也不一定會有多大的改變，所以就算你用內部標準品也不一定非常正確。 除非你自己去做個檢量線 (最保險的方法)。 (因為我不知道你產物的結構所以不好判斷，但是這種情況不是沒有) : : → Silience:簡單來說，就是乖乖去過柱子吧。好好測一測會比較實在 11/08 16:12 : : 我每次說要過column 老師就問我說 那你怎麼知道過完之後不會racemirization : 我也不知道會不會 : 因為之前都是過完柱子 再打HPLC : 但試過10幾種的催化劑 都是50/50 : 老師就提出這個的疑問 : 所以他希望要打crude = = 不是你用手性催化劑就保證有選擇性， 這點自己應該要有認知。 所以就算你打再多的crude也解決不了問題。 : : → kdjf:就用hplc的溶前過柱子啊,有什麼好racemirize的？ 11/08 16:44 : : 因為生成chiral center 是做michael reaction 而來的 : silica gel 微酸 產物是三級amine 要添加 NEt3 才流的出來 : column裡有酸又有鹼 不知道會不會 retro-michael : 所以我也不確定會不會racemirization : 雖然我覺得應該不會 : 但是因為目前做出來都是50/50 而且又沒有單一鏡像異構物的標準品... : 所以我也沒辦法說服老師說 不會 = = 你可以去找文獻，看看有沒有人做過類似的反應。 如果有，然後用跟文獻一樣的條件來分離。 通常基本上不會有什麼大問題。 不過如果真的有retro-michael的話，反應物的量會改變。 這個在NMR下都十分明顯。應該可以觀察的出來。 : ※ 編輯: Corsairs 來自: 140.115.43.96 (11/08 17:03) --

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