作者hunter2525 (Just for you!!!)
看板Chemistry
標題Re: [實驗] 連續稀釋法
時間Tue Oct 9 00:30:54 2012
※ 引述《Jiangnanstyl (Jiangnan)》之銘言:
: 連續稀釋法
: 假設protocol這樣寫
: 6.01 stock 取100ul
: 在加900ul EtOH
: =601mM
: 再來取601mM 100ul
: 在加900ul EtOH
: =60.1mM
: 再來取60.1mM 10ul
: 在加990ul
: =601uM
這裡一次稀釋100倍?!
為何不照之前的10倍稀釋下來?
稀釋倍數過大需等一段時間達平衡
否則這時取的濃度不會剛好是你所要的
可以vorteX久一點或以滴管mix
: 再來取601uM 20ul
: 在加 581 ul EtOH
: =20uM
: 再來取20uM 200ul
: 跟200ul EtOH
: =10uM
: 再來取10uM 200ul
: 跟200ul EtOH
: =5uM
: 以上分別裝到6個eppendort
: 請問各位這要怎麼稀釋壓 最近做出來濃度不是太多就是太少 或者R平方沒0.99
: 以第一步驟來說 我是先用P1000取900ul EtOH
: 在用P200加100ul stock 裝到同個eppendort
: 之後vorteX 兩秒後
: 再把p1000那隻tip 排掉再裝新的tip 取900ul EtOH
: 再用p200取剛剛vortex2秒完100ul 的 601mM濃度
: 裝到第二個eppendorf
: 可是學長說這樣太麻煩了 叫我先把酒精一口氣加完 (把六個eppendorf所需要的)
: 在慢慢加stock
: 可是我照他那用做後就沒0.99了
: 請問各位再做連續稀釋法時都怎麼做~"~
若沒一次加完EtOH會有0.99嗎?(濃度是5uM→601uM ?)
範圍可能太大
建議:(1) 5uM→100uM or 30→601uM
(2) 以syringe取EtOH & standard
(3) 高手請補充...
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◆ From: 182.235.133.109
1F:→ hunter2525:或是配製一個中間濃度的標準品,以此濃度取不同體積 10/09 01:03
2F:→ hunter2525:較不會有混合不均勻的情形,提供給你參考... 10/09 01:05