作者appleson (貢丸)
看板Chemistry
標題[實驗] HPLC Guard Calumn耗損過快的問題
時間Thu Jun 5 12:39:15 2014
我是用WATERS的XBridge C18的 Column做酵素動力學的實驗
主要是將受質跟產物分開觀察比例，但是受質跟產物都沒有光吸收訊號
所以會做衍生反應接上PITC測光吸收
但現在遇到了一個很大的問題
我的Guard Column大約打80支樣品譜線就會分岔，怎麼洗都沒用
換一支新的之後就會恢復正常
一支大概3000元，這樣的頻率去換錢燒得滿兇的
我的樣品跟移動相的溶液都有用0.45um的濾膜過濾過
我想請問是不是有甚麼地方我沒有注意到或是其實他更換的平率就是這麼快?
謝謝大家
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1F：推 cuddi:分析前有除鹽嗎？洗管柱是否確實？ 06/05 12:43
2F：推 frankyoda:問廠商有沒有推薦的型號？或是挖掉column前段？ 06/05 17:26
3F：→ reckson1017:用0.2um濾 06/05 23:11
4F：推 HPLC:恩~有沒有除鹽 這滿重要的!! 而且~我認為它本身就是耗材XDD 06/05 23:16
5F：→ appleson:paper上移動相還有加鹽類耶 還是樣品要除鹽? 06/07 10:55
6F：→ appleson:管柱應該是洗得滿確實的 衝提的體積有到10倍管柱體積 06/07 10:57
7F：→ appleson:請問除鹽是甚麼意思 我不是化學本科出生的 化學不好XD 06/07 11:01
8F：→ tony15899:洗管柱是用什麼洗? 鹽類用純有機相洗不掉啊 06/08 15:08
9F：→ appleson:我用水洗 06/09 15:25
10F：→ shiaobau:移動相更換的頻率多長? 若常用高水相 要注意長菌的問題 06/10 10:45
11F：→ shiaobau:基本上 buffer都要新鮮配置使用 洗管柱用的純水也要新鮮 06/10 10:45
12F：→ shiaobau:如果之前沒注意這個問題的話 LC常用水相的管跟要洗了... 06/10 10:46
13F：→ appleson:所有的BUFFER最久五天會換一次 瓶子也都會洗過 06/12 16:17
14F：→ appleson:我不知道五天算不算太久 大家一般都多久換一次? 06/12 16:18
15F：→ shiaobau:buffer的比例是什麼 buffer裡面如果沒有有機相 隔日換是 06/13 11:58
16F：→ shiaobau:比較好一點... 5天可能都快看到菌絲了... 06/13 11:58
17F：→ appleson:1mM的ammonium acetate 原來需要這麼常換XD 06/14 04:51
18F：→ shiaobau:不那麼常換 最少隔1~2天要再用0.2濾膜過濾一下 然後一實 06/16 11:11
19F：→ shiaobau:驗完就冰起來...如果不難配 最好常換... 06/16 11:11
20F：推 nn1975:不要直接用100%水洗 改10%ACN+90%水 MP的水建議用DIW 06/27 00:47