作者chiralman (鏡像對稱)
看板Chemistry
標題[實驗] Dextrose & Methionine HPLC純化
時間Sun Sep 28 11:14:11 2014
請問版上的各位
最近我想要以單一Column分離Dextrose & Methionine
除了只能以Refractive index來進行偵測
將會在尋找條件上遇到很大的問題外
目前遇到的問題是
由於這兩個化合物目前我只看到只有pKa有顯著的差異
Dextrose(pKa=16) Methionine(pKa=3)
想要詢問版上各位
若想要以pKa為突破點的話
在Column與mobile phase的選擇上應該注意那些問題??
或者版上各位有什麼建議??
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1F：→ ckarabian: 用離子交換樹脂或C18都可以分 如果只是要製備級分離 09/28 12:15
2F：→ ckarabian: 其實可以不用到HPLC. 只是掌握分離之前你的分子的 09/28 12:16
3F：→ ckarabian: protonation form即可 例如用C18分 加入少許TFA在A跑液 09/28 12:17
4F：→ ckarabian: 可以protonate methionine讓它變cationic form, 這樣你 09/28 12:18
5F：→ ckarabian: 跟dextrose一起跑的時候methionine因為帶charge就很容 09/28 12:19
6F：→ ckarabian: 易不被你的stationary phase留住 而比較早流出來 09/28 12:19
7F：→ ckarabian: 其實最簡單的分離方法就酸鹼萃取就好了 09/28 12:21
8F：→ ckarabian: 或是配一隻製備級陽離子交換樹脂分 然後TLC trace分離 09/28 12:23
9F：→ ckarabian: 效果 Methionine用Ninhydrin一下就染得出來了 09/28 12:25