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標 題Re: [問題] 刮細胞要用cell lysis buffer(RIPA)或PBS就好?
發信站清華生命科學 BBS (Sun Apr 30 10:46:21 2006)
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※ 引述《[email protected] (where to go)》之銘言：
> 刮細胞時是應該加入RIPA(含protease inhibitor)再刮,還是先用PBS刮下來
> 收集至離心管後,移去上清液,再加入RIPA(含protease inhibitor)?
> 若先加入PBS來刮細胞,會不會因為尚未加入protease inhibitor於PBS,
> 使得在刮細胞過程中,因為細胞破裂,導致protease釋出而分解破壞protein?
我想不出要先加PBS刮下來再換成RIPA的
而且可溶性的蛋白質在 PBS 下面也是會溶（一些）的
再製換成 RIPA, 原本溶在 PBS 中的不就損失了
會用到 PBS 的 應該是：
先把細胞用 trypsin 或 EDTA 打下來以後
離心 去上清液
加PBS wash
再離心 去上清液
加 RIPA
這樣的流程
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莫非定律:
到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上
補充定律:
拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
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