真的很謝謝O大 你真是一語命中我的痛....>.< 我也知道污染了幾乎就沒得救了 因此我老師也很頭痛 他也不捨得我再重做 我已經碩一下了 所以吩咐我多問問有沒有方法解決 當然 如果沒法子解決 就得重做了Orz 目前的問題是 當大家都說他看起來沒事的時候 我怎麼捨得丟掉呢?? 只是我覺得他怪怪的 於是就說我已經神經質了 冏rz 我又怕我偷懶沒換medium 又污染了 我應該是全實驗室最浪費medium的人了 哈哈 ※ 引述《oplz (Go Heat! Win for Riley!)》之銘言： : ※ 引述《[email protected] (空手打小強XD)》之銘言： : : 我的細胞是挑了很久的stable clone : ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ : : 解凍後卻出現一種現象 : : 就是"污染" : : 看起來會整盤沙沙的 : : 仔細看有很多長短不一的 : : 應該是細菌還是桿菌之類的東西 : : 而且游動的很快.....Orz : : 通常都在第三天突然"爆發" : : 只要在第二天換medium就沒事 : : 我的clone還有價puromycin篩選 : : 想請問有沒有人知道有藥可以處理污染的細胞?? : : 要不然就得重做......Orz : 很多人喊 砍掉重練 之類的話, : 不過我想養過細胞的人多少也知道污染後很難救回來 : 問題在原 po 也說了這是挑了很久的 stable clone, : 再說 stable cell line 個個不同, : 說真的搞不好你一輩子也才有這一次機會拿到現在這支 stable line, : 所以才不捨得就這樣放棄, 上來問有沒有其它的辦法. : 今天有沒有可能救得回來? 機會還是有的, : 看敘述其實應該多少 antibiotic 還是有些壓制的效果 只是不夠 : passage 時離心打散多重覆幾次, : 貼附好後每隔幾小時就用 medium/pbs 洗幾次 換 medium : 重覆幾天, passage 時細胞鋪稀一點, 分在不同 well 中. 這些都有幫助 : 另外離心時減低離心速度與時間, 因為細胞比細菌容易離下來, 也可以減低細菌的量. : 如果可以 找個高倍一點的顯微鏡觀察一下. : 污染時比較麻煩的不是 medium 裡的細菌洗不乾淨, : 是貼附在細胞表面的菌很難在 passage 時一併去掉 : 所以要連續密集 passage 來慢慢減低這些細菌 很難一次 passage 多洗幾次就乾淨的. : 我身邊有人這樣成功救回 cell 過, 我也成功過. : 講這些都比喊個 砍掉重練 這樣一句話有建設性得多. --

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