真的很谢谢O大 你真是一语命中我的痛....>.< 我也知道污染了几乎就没得救了 因此我老师也很头痛 他也不舍得我再重做 我已经硕一下了 所以吩咐我多问问有没有方法解决 当然 如果没法子解决 就得重做了Orz 目前的问题是 当大家都说他看起来没事的时候 我怎麽舍得丢掉呢?? 只是我觉得他怪怪的 於是就说我已经神经质了 冏rz 我又怕我偷懒没换medium 又污染了 我应该是全实验室最浪费medium的人了 哈哈 ※ 引述《oplz (Go Heat! Win for Riley!)》之铭言： : ※ 引述《[email protected] (空手打小强XD)》之铭言： : : 我的细胞是挑了很久的stable clone : ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ : : 解冻後却出现一种现象 : : 就是"污染" : : 看起来会整盘沙沙的 : : 仔细看有很多长短不一的 : : 应该是细菌还是杆菌之类的东西 : : 而且游动的很快.....Orz : : 通常都在第三天突然"爆发" : : 只要在第二天换medium就没事 : : 我的clone还有价puromycin筛选 : : 想请问有没有人知道有药可以处理污染的细胞?? : : 要不然就得重做......Orz : 很多人喊 砍掉重练 之类的话, : 不过我想养过细胞的人多少也知道污染後很难救回来 : 问题在原 po 也说了这是挑了很久的 stable clone, : 再说 stable cell line 个个不同, : 说真的搞不好你一辈子也才有这一次机会拿到现在这支 stable line, : 所以才不舍得就这样放弃, 上来问有没有其它的办法. : 今天有没有可能救得回来? 机会还是有的, : 看叙述其实应该多少 antibiotic 还是有些压制的效果 只是不够 : passage 时离心打散多重覆几次, : 贴附好後每隔几小时就用 medium/pbs 洗几次 换 medium : 重覆几天, passage 时细胞铺稀一点, 分在不同 well 中. 这些都有帮助 : 另外离心时减低离心速度与时间, 因为细胞比细菌容易离下来, 也可以减低细菌的量. : 如果可以 找个高倍一点的显微镜观察一下. : 污染时比较麻烦的不是 medium 里的细菌洗不乾净, : 是贴附在细胞表面的菌很难在 passage 时一并去掉 : 所以要连续密集 passage 来慢慢减低这些细菌 很难一次 passage 多洗几次就乾净的. : 我身边有人这样成功救回 cell 过, 我也成功过. : 讲这些都比喊个 砍掉重练 这样一句话有建设性得多. --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.213.164 ※ 编辑: jingner 来自: 140.120.213.164 (05/10 13:26)