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※ 引述《spunka ()》之銘言: : 目前我在定E.coli的standard curve : 如 OD值所對應的菌數 : 但是細節部分--如何適當培養(是否要orbitally shake或怎麼放大)搞不太清楚 : 因為將來要做抑菌測試 : 所以standard curve很重要 : 不知道有沒有人跟我做類似的題目 : 可以討論看看嗎? 無論你是否搖晃培養都註明就可以了 測量方法有很多種 1. 直接量OD值,由於E.coli生長的速度挺快 看你想要多精準的生長曲線,可以半小時或一小時測一次 2. 塗plate法,一樣每半小時或一小時,取一定量菌液 塗plate,隔天計算菌落數,一隻菌會長成一個菌落(均勻的話) 由於單位一般是使用 菌數/ml 但是你塗plate用 1ml 到最後可能會算到炸掉 所以自動減少量,最後換算時再乘回去 另外,一般使用這種方法最好稀釋幾次 就是取1ml到空試管,加入9ml medium,重複兩三次 不然菌落太多算不完也長不下 3. 使用顯微計算盤,如果使用標準的顯微計算盤 我記得裡面16小格(1大格)的體積是 0.1ul 直接在顯微鏡下數菌數,然後再乘一萬倍 即為菌數 如果你只是做報告,就選一種用,只是每種方法都最好重複三次以上確定無誤 如果你跟我一樣無聊,可以同時使用 最後可以畫出三條幾乎重疊的曲線,比較有可信度 不過要練習一下就是了 -- ∕/ █◣ 無名個人版 ◥█◤ ◢█◣   █◤█ ◢█◣ ◢█◣ ◢██ ◢█◣ ◢██ ◢█◣P_howtostart   ′ ██◤ █◤█ █◤█ █◣ █◤█ █◤█ █◤█ █◤█      ◥█◤ ◥█◤ ◥█◤ ◥█◤ ◥█◤ ◥█◤ ◥█◤ pooldodo --



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