作者pooldodo (破渡渡)
看板Biotech
标题Re: [问题] 有人在做细菌的standard curve吗?
时间Sat May 27 08:09:05 2006
※ 引述《spunka ()》之铭言:
: 目前我在定E.coli的standard curve
: 如 OD值所对应的菌数
: 但是细节部分--如何适当培养(是否要orbitally shake或怎麽放大)搞不太清楚
: 因为将来要做抑菌测试
: 所以standard curve很重要
: 不知道有没有人跟我做类似的题目
: 可以讨论看看吗?
无论你是否摇晃培养都注明就可以了
测量方法有很多种
1. 直接量OD值,由於E.coli生长的速度挺快
看你想要多精准的生长曲线,可以半小时或一小时测一次
2. 涂plate法,一样每半小时或一小时,取一定量菌液
涂plate,隔天计算菌落数,一只菌会长成一个菌落(均匀的话)
由於单位一般是使用 菌数/ml
但是你涂plate用 1ml 到最後可能会算到炸掉
所以自动减少量,最後换算时再乘回去
另外,一般使用这种方法最好稀释几次
就是取1ml到空试管,加入9ml medium,重复两三次
不然菌落太多算不完也长不下
3. 使用显微计算盘,如果使用标准的显微计算盘
我记得里面16小格(1大格)的体积是 0.1ul
直接在显微镜下数菌数,然後再乘一万倍
即为菌数
如果你只是做报告,就选一种用,只是每种方法都最好重复三次以上确定无误
如果你跟我一样无聊,可以同时使用
最後可以画出三条几乎重叠的曲线,比较有可信度
不过要练习一下就是了
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