作者Ottolee (笨 所以要努力)
看板Biotech
標題[問題] 關於DNase 的問題
時間Tue Jun 6 21:00:07 2006
我們抽完RNA時候
要翻cDNA 要先把RNA 用DNase 處理
2ug 的RNA 加入1U的DNase
後來用3 或 4 ug的RNA 處理DNase
後來翻成cDNA 去跑 beta-actin 都沒有出來
聽有人說是因為 如果RNA 濃度太高 DNase 會連RNA 也吃掉
是這樣嗎?????
還有請問 有再抽RNA的大大們 你們是怎樣確定 你們抽的RNA 不包含DNA
你們是用其他啥方法來處理掉DNA的 麻煩你們提供一下寶貴的意見
感謝!!
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◆ From: 140.130.177.144
1F：推 oxoox:你抽完RNA之後沒有跑電泳看看嗎? 06/06 21:41
2F：推 mandible:其實我們LAB很少跑MOPSㄟ!還是看PCR產物就可以看的出RT是 06/06 22:09
3F：→ mandible:是否成功.關鍵在於primer dimer是否有出現! 06/06 22:10
4F：推 Ottolee: 對不起 我說錯了 是2ug RNA 加2U的DNase.. 06/06 22:30
5F：→ Ottolee:抽完RNA 有跑膠... 06/06 22:30
6F：推 datro:可以請問一下 primer dimer有沒有出現是要怎麼判斷阿? 06/07 01:14
7F：推 betrayme:DNase I 還是？ 06/07 11:41
8F：推 lpw4660:有人會做extraction把DNase去掉 確保之後做cDNA時不會被吃 06/07 12:00