作者Ottolee (笨 所以要努力)
看板Biotech
标题[问题] 关於DNase 的问题
时间Tue Jun 6 21:00:07 2006
我们抽完RNA时候
要翻cDNA 要先把RNA 用DNase 处理
2ug 的RNA 加入1U的DNase
後来用3 或 4 ug的RNA 处理DNase
後来翻成cDNA 去跑 beta-actin 都没有出来
听有人说是因为 如果RNA 浓度太高 DNase 会连RNA 也吃掉
是这样吗?????
还有请问 有再抽RNA的大大们 你们是怎样确定 你们抽的RNA 不包含DNA
你们是用其他啥方法来处理掉DNA的 麻烦你们提供一下宝贵的意见
感谢!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.177.144
1F：推 oxoox:你抽完RNA之後没有跑电泳看看吗? 06/06 21:41
2F：推 mandible:其实我们LAB很少跑MOPSㄟ!还是看PCR产物就可以看的出RT是 06/06 22:09
3F：→ mandible:是否成功.关键在於primer dimer是否有出现! 06/06 22:10
4F：推 Ottolee: 对不起 我说错了 是2ug RNA 加2U的DNase.. 06/06 22:30
5F：→ Ottolee:抽完RNA 有跑胶... 06/06 22:30
6F：推 datro:可以请问一下 primer dimer有没有出现是要怎麽判断阿? 06/07 01:14
7F：推 betrayme:DNase I 还是？ 06/07 11:41
8F：推 lpw4660:有人会做extraction把DNase去掉 确保之後做cDNA时不会被吃 06/07 12:00