※ 引述《[email protected] (Ore)》之銘言： : ※在星期一(2006/6/19)上午10點以前回答本問題 才會對此次考試有實質的幫助 謝謝了 : m(_ _)m : 有一天你發現人們腦細胞中有一個基因叫做pass，這個pass基因的表現 : 會隨著用功而有所不同，當用功時pass基因的mRNA會開始累積， : 進而pass protein也開始增加，因此這個pass protein可能具有讓用功人們 : pass所有課程的功能，於是你想研究pass基因的表現機制。 : 因此下列問題必須先釐清： 從以上題目，可得資訊如下： 1. 人有個 pass gene (按：只要有心，人人都有 pass gene XD) 2. 在哪裡表現？在人腦細胞內表現。 3. 怎麼表現？用功 (treatment) 下去就會表現。 4. 什麽機制？ pass 表現使得 pass mRNA 累積而使 pass protein 增加， 此 pass protein 使得人可以有 pass 過課程的功能，故名之。 (以上是題目內合理推測) 另外假設該 gene 已經被定序完成了。 : A.造成pass基因的mRNA累積可能的機制為何? 提假設或是做實驗，先 review 以前人做過的東西。 「學如逆水行舟，不進則退。」 (孔，約 500 B.C.) 由此可知，用功這種 treatment，不給他持續 treat 下去， pass 表現量就會下降。 據此推測，此 pass gene 的 mRNA 極不穩定，半衰期很短， 生產方面不持續補充，很快就沒有了。 所以唯有不斷用功，使得 pass gene 大量表現，才有可能累積。 因此 pass 累積的關鍵在於「持續不斷的用功」。 : B.你如何設計實驗來探討pass基因的mRNA累積的可能機制? 材料 設計實驗不外乎 treatment 與 control。 由於沒有人願意被做 in vivo 的人體試驗。 於是我們找到一種人類腦細胞的 cell line 叫做「記者」。 種株代號叫腦殘，牠們是一種外型像人，但本質上只是細胞集合體的群落。 以此 cell line 來進行之後的實驗。 培養基的部份我們使用「裸體加屍體」 (自蘋果購得) 實驗設計 一部分的腦殘記者我們給他原文書數本，和只能連上學術相關網站的電腦一台。 另一部份我們給他好幾套漫畫，和只能連上 ptt 的電腦一台。 前者為 treatment，後者為 control。 之後我們收細胞 (也就是腦殘記者)，使用一般實驗室常用試劑組合取 RNA。 將 RNA 拿來跑 Q-PCR，比較不同階段 pass gene 的表現量。 (處理一個月、兩個月、三個月，一個月處理，下個月不處理 再下個月再處理 (chase and pulse) 等等組別) 我們期待實驗結果是有持續給予原文書和學術網站的記者會有 pass 穩定且高量的累積。 而 control 組則是繼續腦殘。 RNA 的萃取部份 將腦殘記者收集起來，直接打碎、均質離心，接著用 kit 抽取即可。 蛋白質部份雷同，只是換個 kit。 : C.你如何設計實驗來探討與證明pass protein參與讓用功人們pass所有的課程的機制? 通過課程是一種現象，此種現象之達成必有課程蛋白參予其中。 所以本研究目的為探討 pass protein 與課程蛋白的交互作用與作用位置。 一樣用腦殘記者的 cell line。 做 Yeast two hybrid，看 pass 與「課程相關蛋白」有沒有 interaction。 另外用昆蟲細胞大量生產該 pass protein 做抗體，回去 FISH 經過用功或是不用功處理的記者腦袋。 : (本大題配分20分) : (A.大概知道答案 問題是B.和C.的答案比較不確定) 本文虎爛成分大於回答，內容僅供參考，切勿拿來作答。 XD --

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