※ 引述《[email protected] (Ore)》之铭言： : ※在星期一(2006/6/19)上午10点以前回答本问题 才会对此次考试有实质的帮助 谢谢了 : m(_ _)m : 有一天你发现人们脑细胞中有一个基因叫做pass，这个pass基因的表现 : 会随着用功而有所不同，当用功时pass基因的mRNA会开始累积， : 进而pass protein也开始增加，因此这个pass protein可能具有让用功人们 : pass所有课程的功能，於是你想研究pass基因的表现机制。 : 因此下列问题必须先厘清： 从以上题目，可得资讯如下： 1. 人有个 pass gene (按：只要有心，人人都有 pass gene XD) 2. 在哪里表现？在人脑细胞内表现。 3. 怎麽表现？用功 (treatment) 下去就会表现。 4. 什麽机制？ pass 表现使得 pass mRNA 累积而使 pass protein 增加， 此 pass protein 使得人可以有 pass 过课程的功能，故名之。 (以上是题目内合理推测) 另外假设该 gene 已经被定序完成了。 : A.造成pass基因的mRNA累积可能的机制为何? 提假设或是做实验，先 review 以前人做过的东西。 「学如逆水行舟，不进则退。」 (孔，约 500 B.C.) 由此可知，用功这种 treatment，不给他持续 treat 下去， pass 表现量就会下降。 据此推测，此 pass gene 的 mRNA 极不稳定，半衰期很短， 生产方面不持续补充，很快就没有了。 所以唯有不断用功，使得 pass gene 大量表现，才有可能累积。 因此 pass 累积的关键在於「持续不断的用功」。 : B.你如何设计实验来探讨pass基因的mRNA累积的可能机制? 材料 设计实验不外乎 treatment 与 control。 由於没有人愿意被做 in vivo 的人体试验。 於是我们找到一种人类脑细胞的 cell line 叫做「记者」。 种株代号叫脑残，牠们是一种外型像人，但本质上只是细胞集合体的群落。 以此 cell line 来进行之後的实验。 培养基的部份我们使用「裸体加屍体」 (自苹果购得) 实验设计 一部分的脑残记者我们给他原文书数本，和只能连上学术相关网站的电脑一台。 另一部份我们给他好几套漫画，和只能连上 ptt 的电脑一台。 前者为 treatment，後者为 control。 之後我们收细胞 (也就是脑残记者)，使用一般实验室常用试剂组合取 RNA。 将 RNA 拿来跑 Q-PCR，比较不同阶段 pass gene 的表现量。 (处理一个月、两个月、三个月，一个月处理，下个月不处理 再下个月再处理 (chase and pulse) 等等组别) 我们期待实验结果是有持续给予原文书和学术网站的记者会有 pass 稳定且高量的累积。 而 control 组则是继续脑残。 RNA 的萃取部份 将脑残记者收集起来，直接打碎、均质离心，接着用 kit 抽取即可。 蛋白质部份雷同，只是换个 kit。 : C.你如何设计实验来探讨与证明pass protein参与让用功人们pass所有的课程的机制? 通过课程是一种现象，此种现象之达成必有课程蛋白参予其中。 所以本研究目的为探讨 pass protein 与课程蛋白的交互作用与作用位置。 一样用脑残记者的 cell line。 做 Yeast two hybrid，看 pass 与「课程相关蛋白」有没有 interaction。 另外用昆虫细胞大量生产该 pass protein 做抗体，回去 FISH 经过用功或是不用功处理的记者脑袋。 : (本大题配分20分) : (A.大概知道答案 问题是B.和C.的答案比较不确定) 本文虎烂成分大於回答，内容仅供参考，切勿拿来作答。 XD --

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