作者Bumbman (inside)
站內Biotech
標題Re: 請問怎麼把蛋白質從PAGE上elute出來?
時間Wed Jun 28 19:31:06 2006
我有用過protein gel extraction 的方法,
就像DNA/RNA做挖膠純化一樣,
先把protein sample(加loadding buffer)拿去run SDS-PAGE
能loadding多少就loadding多少,有幾個well就用幾個well
跑的時候順便一起跑marker,雖然沒有染色 因為你之前跑過gel
知道大概要要挖哪裡,就將那一排整個用解剖刀切下來,
之後照著Analytical Biochemistry 268, 15-20(1999)這篇paper
的步驟,整個流程我只有額外買一種藥品Saphadex G-25
發明這個方法的作者宣稱,用這種方式純化出來的protein可以保有其活性!!!
但是我覺得缺點是出來的濃度很低,若是要高濃度還要再濃縮.
希望有幫助到你
※ 引述《aggaci (有氣質的台客)》之銘言：
: 除了用電極的方法 以及買kit...
: 有沒有其他的方法呢?
: 我是跑native PAGE再把想要的band挖出來跑sds-page...
: 謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.63.190
1F：推 aggaci:Thanks, I'll try it. 06/28 19:49
2F：推 longy:跑完SDS-PAGE後 protein還有活性嗎? 06/28 20:05
3F：推 threestars:naive protein才有 06/29 01:54