作者Bumbman (inside)
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标题Re: 请问怎麽把蛋白质从PAGE上elute出来?
时间Wed Jun 28 19:31:06 2006
我有用过protein gel extraction 的方法,
就像DNA/RNA做挖胶纯化一样,
先把protein sample(加loadding buffer)拿去run SDS-PAGE
能loadding多少就loadding多少,有几个well就用几个well
跑的时候顺便一起跑marker,虽然没有染色 因为你之前跑过gel
知道大概要要挖哪里,就将那一排整个用解剖刀切下来,
之後照着Analytical Biochemistry 268, 15-20(1999)这篇paper
的步骤,整个流程我只有额外买一种药品Saphadex G-25
发明这个方法的作者宣称,用这种方式纯化出来的protein可以保有其活性!!!
但是我觉得缺点是出来的浓度很低,若是要高浓度还要再浓缩.
希望有帮助到你
※ 引述《aggaci (有气质的台客)》之铭言：
: 除了用电极的方法 以及买kit...
: 有没有其他的方法呢?
: 我是跑native PAGE再把想要的band挖出来跑sds-page...
: 谢谢
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◆ From: 140.112.63.190
1F：推 aggaci:Thanks, I'll try it. 06/28 19:49
2F：推 longy:跑完SDS-PAGE後 protein还有活性吗? 06/28 20:05
3F：推 threestars:naive protein才有 06/29 01:54