作者tzuling0815 (豔陽天.晴)
看板Biotech
標題[問題] PCR不成功的因素？？
時間Tue Jul 11 18:54:49 2006
專題實驗一直在做 PCR 跑膠..
但是沒有一次成功...
換過primer，重新設定過PCR的溫度
連老師自己操作都做不出來～
跑膠後甚麼東西都看不到...到今天已經失敗第5次了..
想請問大家，有麼因素是會影響PCR的結果嗎？
（目前我們也懷疑是 水 的純度不夠高）
順便問一下嚕～有沒有甚麼好的網站可以協助我們設計primer呢？
（國家衛生研究院嗎？）
謝謝嚕！
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我的小小天地～
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◆ From: 218.168.133.38
1F：推 havenn:加DMSO? 07/11 18:56
2F：推 meiosisLin:察看GC值，GC太高可以加DMSO試試看..不要超過總體積5% 07/11 19:11
3F：→ foxrose:dNTP, buffer或enzyme 等等都有可能出問題 07/11 21:27
4F：→ foxrose:可以一個一個去試 看問題在哪 不然就全部換新囉 07/11 21:29
5F：推 chiehgriffin:template是甚麼呢？ 07/12 20:45
6F：推 oscarcc:我知道有個軟體vector NTI可以分析序列.設計primer 07/12 22:54
7F：推 artistic:cycle數不對.我之前30cycle跑不出來.變35cycle就出來了 07/13 19:36
8F：推 melodyrabbit:若是RT-PCR的template,quality夠好嗎?若從plasmid或 07/14 01:31
9F：→ melodyrabbit:cDNA library,template再稀釋到500,1000倍試試 07/14 01:33