作者tzuling0815 (艳阳天.晴)
看板Biotech
标题[问题] PCR不成功的因素？？
时间Tue Jul 11 18:54:49 2006
专题实验一直在做 PCR 跑胶..
但是没有一次成功...
换过primer，重新设定过PCR的温度
连老师自己操作都做不出来～
跑胶後甚麽东西都看不到...到今天已经失败第5次了..
想请问大家，有麽因素是会影响PCR的结果吗？
（目前我们也怀疑是 水 的纯度不够高）
顺便问一下噜～有没有甚麽好的网站可以协助我们设计primer呢？
（国家卫生研究院吗？）
谢谢噜！
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我的小小天地～
http://www.wretch.cc/album/tzuling0815
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.168.133.38
1F：推 havenn:加DMSO? 07/11 18:56
2F：推 meiosisLin:察看GC值，GC太高可以加DMSO试试看..不要超过总体积5% 07/11 19:11
3F：→ foxrose:dNTP, buffer或enzyme 等等都有可能出问题 07/11 21:27
4F：→ foxrose:可以一个一个去试 看问题在哪 不然就全部换新罗 07/11 21:29
5F：推 chiehgriffin:template是甚麽呢？ 07/12 20:45
6F：推 oscarcc:我知道有个软体vector NTI可以分析序列.设计primer 07/12 22:54
7F：推 artistic:cycle数不对.我之前30cycle跑不出来.变35cycle就出来了 07/13 19:36
8F：推 melodyrabbit:若是RT-PCR的template,quality够好吗?若从plasmid或 07/14 01:31
9F：→ melodyrabbit:cDNA library,template再稀释到500,1000倍试试 07/14 01:33