作者linker0726 (試著獨立)
看板Biotech
標題Re: [問題] western blot 壓片的問題..
時間Fri Jul 21 19:10:11 2006
※ 引述《threestars (等待)》之銘言：
: PBS應該不會干擾 用PBST效果很OK
恩.其實我不知道這兩個有什麼差別耶..PBST多加了什麼嗎?? 多加了tween20嗎?
: 稀釋抗體我用blocking buffer
: 也就是10% 安佳脫脂奶粉(好像安佳的效果最好)溶在HBS buffer
^^^^^^^^^^ 請問這是什麼阿??
: 我也用過 實驗用BSA/PBST(PBS+Tween20) 也是10%
: 效果更好 不過實驗用BSA 很貴 所以我比較少用
: (TBST 我沒試過 不過隔壁實驗室的說 加了Tris-base後怪怪的
: 所以我就沒有用了)
: 之前有一段時間用5% 也是OK
: phospho-ERK 訊號弱很多 最好能有control
: 來確定是實驗出錯(操作或試劑問題)還是本身實驗就沒有磷酸化的結果
: 換了 cell signaling 我真的覺得抗體本身的品質是影響最大的
: 雖然Santa Cruz便宜很多但data出不來
: 結果浪費更多其他的regent 也浪費時間
: 如果聖誕牌的抗體 很糟糕 你可以去跟弘晉抱怨
: 要求可不可以換不同批號 的抗體
: 不過要填很多問題給Snanta Cruz原廠 還有附上做不出來的照片
: 或問題很多的data 大約兩三個禮拜 就會有新抗體過來了
嗯嗯..我會跟學長姐說看看
感謝你的意見
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 125.228.152.233
1F：推 hoton:對阿 是多加了tween 20 07/22 17:57
2F：推 NTL7:phospho-ERK一定要買cell signaling, 用的時候不可以用牛奶 07/28 19:53