作者linker0726 (试着独立)
看板Biotech
标题Re: [问题] western blot 压片的问题..
时间Fri Jul 21 19:10:11 2006
※ 引述《threestars (等待)》之铭言：
: PBS应该不会干扰 用PBST效果很OK
恩.其实我不知道这两个有什麽差别耶..PBST多加了什麽吗?? 多加了tween20吗?
: 稀释抗体我用blocking buffer
: 也就是10% 安佳脱脂奶粉(好像安佳的效果最好)溶在HBS buffer
^^^^^^^^^^ 请问这是什麽阿??
: 我也用过 实验用BSA/PBST(PBS+Tween20) 也是10%
: 效果更好 不过实验用BSA 很贵 所以我比较少用
: (TBST 我没试过 不过隔壁实验室的说 加了Tris-base後怪怪的
: 所以我就没有用了)
: 之前有一段时间用5% 也是OK
: phospho-ERK 讯号弱很多 最好能有control
: 来确定是实验出错(操作或试剂问题)还是本身实验就没有磷酸化的结果
: 换了 cell signaling 我真的觉得抗体本身的品质是影响最大的
: 虽然Santa Cruz便宜很多但data出不来
: 结果浪费更多其他的regent 也浪费时间
: 如果圣诞牌的抗体 很糟糕 你可以去跟弘晋抱怨
: 要求可不可以换不同批号 的抗体
: 不过要填很多问题给Snanta Cruz原厂 还有附上做不出来的照片
: 或问题很多的data 大约两三个礼拜 就会有新抗体过来了
嗯嗯..我会跟学长姐说看看
感谢你的意见
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 125.228.152.233
1F：推 hoton:对阿 是多加了tween 20 07/22 17:57
2F：推 NTL7:phospho-ERK一定要买cell signaling, 用的时候不可以用牛奶 07/28 19:53