作者aggaci (有氣質的台客)
看板Biotech
標題Re: [問題] 有關commercial plasmid的問題...
時間Mon Jul 24 23:23:36 2006
※ 引述《siberianiris (紫色鳶尾花~)》之銘言：
: 今天學姊問我一個關於commercial plasmid的問題
: 他從別的實驗室要到一種買來的plasmid
: 產品網址如下:
: http://www.stratagene.com/products/showProduct.aspx?pid=471
: 就是上面網址的PathDetectR Cis-Reporting Systems
: 其中的 NF-kB Cis-Reporter Plasmid
: 他問 自己在E coli複製大量後 怎麼去確認？
: 就是問說 要用哪兩個restriction enzyme去切下insert？
: 我有看完整份說明書 但是沒有找到他是用哪兩種RE...
: 而那個plasmid只有找到map... 還有vector的序列而已...
: 想請問板上的學長姊是否知道該怎麼去查？
: 先說聲謝謝 希望可以給小的一點點指示...
: 很想知道 但是想不出來>_<
通常不是這樣check...
我看你應該是要看NF-kB活化的情形
但是你不知道這個plasmid能用否?
要怎麼知道?
做個positive control不就得了?
通常是用LPS...
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興趣:做實驗、看PAPER、玩音響、聽音樂、養楓葉鼠、彈鋼琴
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◆ From: 140.114.100.165
1F：→ aggaci:而且買來的通常不會有錯，尤其是向Strategene這種大廠 07/24 23:34
2F：→ aggaci:真要check，設primer定序，看是否跟廠商說的序列一致 07/24 23:35
3F：推 siberianiris:我看vector map上MCS中有6個RE切點...那如果是原本廠 07/25 00:42
4F：→ siberianiris:商賣的plasmid MCS部分是整個被enhance element置換 07/25 00:44
5F：→ siberianiris:掉嗎？^^" 07/25 00:45
6F：推 jsi:用RE check plasmid是簡單而常用的方法之一 07/25 01:15
7F：推 jsi:通常insert是塞進MCS之中 不知道這樣提示是否可以想出如何切 07/25 01:18
8F：→ jsi:出insert? 原po的問題是學姐給的回家作業嗎? 07/25 01:19
9F：推 siberianiris:對押 可是買來的plasmid上 我找不到是那兩個RE切點 07/25 10:06
10F：推 siberianiris:不是作業 是學姊實驗上遇到的問題 他們已經解決~ 07/25 10:10
11F：→ siberianiris:但是我有問怎麼解決 可是學姊說太複雜我不需要知道 07/25 10:10
12F：→ siberianiris:可是我還是很想知道^^:我不好意思一直多問~ 07/25 10:11