作者aggaci (有气质的台客)
看板Biotech
标题Re: [问题] 有关commercial plasmid的问题...
时间Mon Jul 24 23:23:36 2006
※ 引述《siberianiris (紫色鸢尾花~)》之铭言：
: 今天学姊问我一个关於commercial plasmid的问题
: 他从别的实验室要到一种买来的plasmid
: 产品网址如下:
: http://www.stratagene.com/products/showProduct.aspx?pid=471
: 就是上面网址的PathDetectR Cis-Reporting Systems
: 其中的 NF-kB Cis-Reporter Plasmid
: 他问 自己在E coli复制大量後 怎麽去确认？
: 就是问说 要用哪两个restriction enzyme去切下insert？
: 我有看完整份说明书 但是没有找到他是用哪两种RE...
: 而那个plasmid只有找到map... 还有vector的序列而已...
: 想请问板上的学长姊是否知道该怎麽去查？
: 先说声谢谢 希望可以给小的一点点指示...
: 很想知道 但是想不出来>_<
通常不是这样check...
我看你应该是要看NF-kB活化的情形
但是你不知道这个plasmid能用否?
要怎麽知道?
做个positive control不就得了?
通常是用LPS...
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◆ From: 140.114.100.165
1F：→ aggaci:而且买来的通常不会有错，尤其是向Strategene这种大厂 07/24 23:34
2F：→ aggaci:真要check，设primer定序，看是否跟厂商说的序列一致 07/24 23:35
3F：推 siberianiris:我看vector map上MCS中有6个RE切点...那如果是原本厂 07/25 00:42
4F：→ siberianiris:商卖的plasmid MCS部分是整个被enhance element置换 07/25 00:44
5F：→ siberianiris:掉吗？^^" 07/25 00:45
6F：推 jsi:用RE check plasmid是简单而常用的方法之一 07/25 01:15
7F：推 jsi:通常insert是塞进MCS之中 不知道这样提示是否可以想出如何切 07/25 01:18
8F：→ jsi:出insert? 原po的问题是学姐给的回家作业吗? 07/25 01:19
9F：推 siberianiris:对押 可是买来的plasmid上 我找不到是那两个RE切点 07/25 10:06
10F：推 siberianiris:不是作业 是学姊实验上遇到的问题 他们已经解决~ 07/25 10:10
11F：→ siberianiris:但是我有问怎麽解决 可是学姊说太复杂我不需要知道 07/25 10:10
12F：→ siberianiris:可是我还是很想知道^^:我不好意思一直多问~ 07/25 10:11