※ 引述《[email protected] (忙忙茫.....)》之銘言： : ※ 引述《[email protected] (墮天使)》之銘言： : : 今天我就取７天大wistar鼠的小腦，放入KERB後用剪刀剪碎，然後就加trpsin和DNAse， : : 25分鐘後加inhibitor，再25分鐘後離心，取上清液用45um過濾 : ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ : 這步驟有錯吧 : 我的protocal是去掉上清液 : 留下沈澱物再用medium打散耶 : 離心過細胞都沈澱了 : 上清液怎麼會有東西XD 囧，果然弄錯了，我一直想說要過濾，所以不清楚這個步驟要幹嘛，就取錯了。 不過我這次重做，卻發生一個奇怪的問題，我在離心後，發現細胞少的可憐，而且學長 的上清液是透明的，但我的上清液卻有絲狀懸浮，很像棉絮那樣，我離好幾次都一樣， 請問這又是什麼問題呢？ 我這次只是在PIPETING時，用力抵住下方，然後歪一點點再用力來回沖，想用水壓沖更 散，其他步驟則是和上次一樣，請問這是就問題所在嗎？ : : （要的細胞小於45u）然後再離心，去掉上清液在加培養液..... : : 問題是，之後數細胞時，根本沒細胞，之前第二次離心時，也沒看到沉澱。 : : 雖然我去上清液把細胞吸掉也有可能，但我覺得根本問題就是細胞太少，也就是一開始 : : 小腦切不夠細，所以想請問一下有沒有什麼好辦法可以讓腦可以容易分離成單細胞， : : 不用浪費太多小鼠就能取得足夠量神經細胞？我覺得用剪刀剪小腦實在不是好方法.... -- 太初有道，道與耶和華同在，道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。 萬物乃藉祂所造，凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭， 這生命就是人的光。光照在黑暗裡，黑暗卻不接受光。 吾輩乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦誘惑，回歸黑暗。 我不斷地徘徊於光明與黑暗之間，從被造之日至今，又自今直到那審判之日的來臨。 --

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