※ 引述《[email protected] (忙忙茫.....)》之铭言： : ※ 引述《[email protected] (堕天使)》之铭言： : : 今天我就取７天大wistar鼠的小脑，放入KERB後用剪刀剪碎，然後就加trpsin和DNAse， : : 25分钟後加inhibitor，再25分钟後离心，取上清液用45um过滤 : ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ : 这步骤有错吧 : 我的protocal是去掉上清液 : 留下沈淀物再用medium打散耶 : 离心过细胞都沈淀了 : 上清液怎麽会有东西XD 囧，果然弄错了，我一直想说要过滤，所以不清楚这个步骤要干嘛，就取错了。 不过我这次重做，却发生一个奇怪的问题，我在离心後，发现细胞少的可怜，而且学长 的上清液是透明的，但我的上清液却有丝状悬浮，很像棉絮那样，我离好几次都一样， 请问这又是什麽问题呢？ 我这次只是在PIPETING时，用力抵住下方，然後歪一点点再用力来回冲，想用水压冲更 散，其他步骤则是和上次一样，请问这是就问题所在吗？ : : （要的细胞小於45u）然後再离心，去掉上清液在加培养液..... : : 问题是，之後数细胞时，根本没细胞，之前第二次离心时，也没看到沉淀。 : : 虽然我去上清液把细胞吸掉也有可能，但我觉得根本问题就是细胞太少，也就是一开始 : : 小脑切不够细，所以想请问一下有没有什麽好办法可以让脑可以容易分离成单细胞， : : 不用浪费太多小鼠就能取得足够量神经细胞？我觉得用剪刀剪小脑实在不是好方法.... -- 太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。 万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头， 这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。 吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。 我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.137.72