看板Biotech
標 題protein無法induce
發信站生生不息 (Thu Aug 3 13:13:18 2006)
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我使用pGEX-KG來產GST fusion protein
sequence出來的結果是正確的
但是在SDS-PAGE上沒有IPTG induction的痕跡
不死心的用western blotting check
可以偵測到GST和我的protein的signal
有沒有人知道為什麼
要怎麼解決?
拜託知道的人解答一下 感激不盡!!
--
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igin:
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uthor:
chianny 從 210.241.43.125 發表
1F：推 alaric:protein express濃度不夠吧. 可能要抓IPTG誘導最適條件. 08/03 17:01
2F：推 longy:PAGE和western的靈敏度差很多吧!! 08/03 18:32
3F：→ longy:你的蛋白質量應該非常少吧~~~ 08/03 18:34
4F：推 Orstor:可以用銀染試看看呀 08/03 19:20
5F：推 aggaci:你做WB是用supernatant或是全細胞 cell lysate去做? 08/03 23:28
6F：推 milkriver:western跑的出來銀染應該也沒問題 要在page上看到band 08/04 14:48
7F：→ milkriver:可以試試看把medium拿去濃縮 08/04 14:49
8F：→ ROKEE:銀染的威力大概在1-10ng，但western可以衝到1-10pg 08/05 01:41
9F：推 aggaci:若要用銀染或western blot才看的到蛋白質，那有做的價值嗎? 08/05 15:14