看板Biotech
标 题protein无法induce
发信站生生不息 (Thu Aug 3 13:13:18 2006)
转信站ptt!Group.NCTU!grouppost!Group.NCTU!nculs
我使用pGEX-KG来产GST fusion protein
sequence出来的结果是正确的
但是在SDS-PAGE上没有IPTG induction的痕迹
不死心的用western blotting check
可以侦测到GST和我的protein的signal
有没有人知道为什麽
要怎麽解决?
拜托知道的人解答一下 感激不尽!!
--
◤◥ Or
igin:
中央生科˙生生不息 nculs.twbbs.org.tw
◣◢ A
uthor:
chianny 从 210.241.43.125 发表
1F：推 alaric:protein express浓度不够吧. 可能要抓IPTG诱导最适条件. 08/03 17:01
2F：推 longy:PAGE和western的灵敏度差很多吧!! 08/03 18:32
3F：→ longy:你的蛋白质量应该非常少吧~~~ 08/03 18:34
4F：推 Orstor:可以用银染试看看呀 08/03 19:20
5F：推 aggaci:你做WB是用supernatant或是全细胞 cell lysate去做? 08/03 23:28
6F：推 milkriver:western跑的出来银染应该也没问题 要在page上看到band 08/04 14:48
7F：→ milkriver:可以试试看把medium拿去浓缩 08/04 14:49
8F：→ ROKEE:银染的威力大概在1-10ng，但western可以冲到1-10pg 08/05 01:41
9F：推 aggaci:若要用银染或western blot才看的到蛋白质，那有做的价值吗? 08/05 15:14