作者Fourfish (我是？    )
看板Biotech
標題[問題] DNA elute後大小變了
時間Mon Aug 14 17:23:09 2006
之前把PCR product接到TA vector確定insert進去後
現在要把insert用RE切下來 （double digest）
RE過後 先用平常DNA電泳的agarose（1.5％）跑過
確定有東西且在"1500bp"左右
現在問題來了....
我把相同的RE後產物 跑完low melting agarose
(我們家用同樣agarose粉末 不過是配成0.8%的膠)
切膠、用kit把DNA elute出來
再跑電泳（1.5%膠）確定 結果大小卻掉到"1000bp"多一點......
想請問這什麼回事...
只是經過切膠純化怎麼大小就變了...實在不敢確定那是我要的insert片段
可以指點我一下嗎...謝謝^^
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◆ From: 140.127.215.12
1F：推 Crow22312:RE的產物已經確定過了 為什麼還要跑膠, 再用Kit elute? 08/14 19:23
2F：→ Crow22312:若只是想洗掉那些buffer, 直接拿gel extract的kit洗就好 08/14 19:25
3F：推 Crow22312:至少烏鴉的實驗室是這樣子做的:P (略過溶膠的buffer) 08/14 20:13
4F：推 Fourfish:喔喔 因為我要ligation到另一個vector做表現 08/14 22:02