作者Fourfish (我是？    )
看板Biotech
标题[问题] DNA elute後大小变了
时间Mon Aug 14 17:23:09 2006
之前把PCR product接到TA vector确定insert进去後
现在要把insert用RE切下来 （double digest）
RE过後 先用平常DNA电泳的agarose（1.5％）跑过
确定有东西且在"1500bp"左右
现在问题来了....
我把相同的RE後产物 跑完low melting agarose
(我们家用同样agarose粉末 不过是配成0.8%的胶)
切胶、用kit把DNA elute出来
再跑电泳（1.5%胶）确定 结果大小却掉到"1000bp"多一点......
想请问这什麽回事...
只是经过切胶纯化怎麽大小就变了...实在不敢确定那是我要的insert片段
可以指点我一下吗...谢谢^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.215.12
1F：推 Crow22312:RE的产物已经确定过了 为什麽还要跑胶, 再用Kit elute? 08/14 19:23
2F：→ Crow22312:若只是想洗掉那些buffer, 直接拿gel extract的kit洗就好 08/14 19:25
3F：推 Crow22312:至少乌鸦的实验室是这样子做的:P (略过溶胶的buffer) 08/14 20:13
4F：推 Fourfish:喔喔 因为我要ligation到另一个vector做表现 08/14 22:02