作者wea (gh)
看板Biotech
標題Re: [問題] DNA elute後大小變了
時間Tue Aug 15 11:54:06 2006
※ 引述《Fourfish (我是？    )》之銘言：
: 之前把PCR product接到TA vector確定insert進去後
: 現在要把insert用RE切下來 （double digest）
: RE過後 先用平常DNA電泳的agarose（1.5％）跑過
: 確定有東西且在"1500bp"左右
: 現在問題來了....
: 我把相同的RE後產物 跑完low melting agarose
: (我們家用同樣agarose粉末 不過是配成0.8%的膠)
: 切膠、用kit把DNA elute出來
: 再跑電泳（1.5%膠）確定 結果大小卻掉到"1000bp"多一點......
: 想請問這什麼回事...
: 只是經過切膠純化怎麼大小就變了...實在不敢確定那是我要的insert片段
: 可以指點我一下嗎...謝謝^^
如果不是操作過程中 弄錯了什麼
應該沒關係的
1.你可以將elute出來的溶液 取一點再用一樣的primer PCR看看
能不能p出一樣的band
2.做gel extraction 不一定要配成0.8% 也能work吧
3.如果真的不確定是不是你的insert，可送定序
(應該沒必要到這一步)_
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◆ From: 61.229.147.209
1F：推 Fourfish:primer的binding site被切掉了 可能也P不出來 我試試=..= 08/15 12:42
2F：→ Fourfish:我家習慣用0.8%做extraction之前也都沒問題 謝謝你喔！^^ 08/15 12:44