作者wea (gh)
看板Biotech
标题Re: [问题] DNA elute後大小变了
时间Tue Aug 15 11:54:06 2006
※ 引述《Fourfish (我是？    )》之铭言：
: 之前把PCR product接到TA vector确定insert进去後
: 现在要把insert用RE切下来 （double digest）
: RE过後 先用平常DNA电泳的agarose（1.5％）跑过
: 确定有东西且在"1500bp"左右
: 现在问题来了....
: 我把相同的RE後产物 跑完low melting agarose
: (我们家用同样agarose粉末 不过是配成0.8%的胶)
: 切胶、用kit把DNA elute出来
: 再跑电泳（1.5%胶）确定 结果大小却掉到"1000bp"多一点......
: 想请问这什麽回事...
: 只是经过切胶纯化怎麽大小就变了...实在不敢确定那是我要的insert片段
: 可以指点我一下吗...谢谢^^
如果不是操作过程中 弄错了什麽
应该没关系的
1.你可以将elute出来的溶液 取一点再用一样的primer PCR看看
能不能p出一样的band
2.做gel extraction 不一定要配成0.8% 也能work吧
3.如果真的不确定是不是你的insert，可送定序
(应该没必要到这一步)_
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◆ From: 61.229.147.209
1F：推 Fourfish:primer的binding site被切掉了 可能也P不出来 我试试=..= 08/15 12:42
2F：→ Fourfish:我家习惯用0.8%做extraction之前也都没问题 谢谢你喔！^^ 08/15 12:44