作者ginmol (儲備博士)
看板Biotech
標題想請問大家跑蛋白電泳的經驗
時間Thu Sep 14 22:51:38 2006
到底需要多少量的蛋白質load到SDS-PAGE，
才能在轉漬後可以萬無一失的偵測到band？
特別是有磷酸化的蛋白？....
10 microgram是不是過低？(因為細胞不多)
感謝!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 220.142.116.211
1F：推 godinal:如果是cell lysate 我習慣放30microgram protein 09/15 00:02
2F：→ godinal:如果是purified single protein要做western0.2ug就看得到 09/15 00:03
3F：→ godinal:決定於你的抗體好壞...不知道對你是否有幫助 09/15 00:04
4F：推 CsmuKoji:transfer抓得好 detect沒煩惱 09/15 00:23
5F：推 spunka:可以查一下相關的paper 看看別人做你那種蛋白的都load多少뀠 09/15 02:12
6F：→ picar:20就好 20以上常常會saturate~~~ 09/15 09:53
7F：→ picar:20 microgram 09/15 09:54
8F：→ mandible:看組織或細胞的蛋白質濃度.另外抗體好壞也是重點之ㄧ 09/15 10:08
9F：→ shaintane:我覺得15microgram還蠻剛好的.. 09/15 15:58
10F：推 Duckhunter:Substrate也有影響~ 09/15 19:49