作者ginmol (储备博士)
看板Biotech
标题想请问大家跑蛋白电泳的经验
时间Thu Sep 14 22:51:38 2006
到底需要多少量的蛋白质load到SDS-PAGE，
才能在转渍後可以万无一失的侦测到band？
特别是有磷酸化的蛋白？....
10 microgram是不是过低？(因为细胞不多)
感谢!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 220.142.116.211
1F：推 godinal:如果是cell lysate 我习惯放30microgram protein 09/15 00:02
2F：→ godinal:如果是purified single protein要做western0.2ug就看得到 09/15 00:03
3F：→ godinal:决定於你的抗体好坏...不知道对你是否有帮助 09/15 00:04
4F：推 CsmuKoji:transfer抓得好 detect没烦恼 09/15 00:23
5F：推 spunka:可以查一下相关的paper 看看别人做你那种蛋白的都load多少뀠 09/15 02:12
6F：→ picar:20就好 20以上常常会saturate~~~ 09/15 09:53
7F：→ picar:20 microgram 09/15 09:54
8F：→ mandible:看组织或细胞的蛋白质浓度.另外抗体好坏也是重点之ㄧ 09/15 10:08
9F：→ shaintane:我觉得15microgram还蛮刚好的.. 09/15 15:58
10F：推 Duckhunter:Substrate也有影响~ 09/15 19:49