※ 引述《linzhengzhan (研究所：碩士班vs博士班)》之銘言： : ※ 引述《ici (南飛的意義)》之銘言： : : 問題一 : : 若是第一次養 plate上只有長一些些 : : 可以在flow裡面 用loop直接將第一次長的菌拉開後 再送回incubator嗎? : 視情況而定，如果已放超過16hr的話，不建議這樣作，因為怕菌在長時間培養會有問題， : 也怕已長出的菌會太老，使活性降低……；如果放的時間不足16hr的話，就繼續養吧…… : 建議： : 把少量的菌，先種至broth放大，再劃plate存下來；E. coli在LB plate上只有 : 一個月的保存期限，每一個月要劃一次菌…… : : 問題二 : : 若菌沒有長 這個plate可以再使用嗎? (接種同一菌株) : 不可以，怕會汙染到之後要種的菌，所以最要是換一片plate，以確保安全…… : : 問題三 : : 4度C冷藏保存是為了pause cell cycle : : 那冷藏過的plate(或裝有medium 的tube) 可以再送回incubator繼續培養嗎? : 在以前，有將plate放到4℃後，再拿出來養，是可以的，但是限少數情況，理由同問題一 : ；而裝有medium的tube也是ok，但不要超過一天，因為菌的活性會降的很低，也限少數 : 情況…… 若冰過再拿出來養, 生長的速度一定會變慢, 但是沒辦法掌握他到底變得多慢, 若是在還沒完全恢復活性的時候, 就做實驗, 結果可能會非常怪異; 而且也不知道在冷藏的過程中, 會不會影響到菌的生理或什麼的... 如果因為短時間不做而冷藏起來, 以前我們實驗室會要求, 拿出來後先接到裝 medium 的 tube 裡養一天, 再接到另一支 tube 裡, 再養一天, 一定要接兩次, 觀察其生長回復正常之後, 才能開始做實驗. 我曾經偷懶只接一次就做實驗, 可能是活性真的沒有恢復, 結果非常怪異, 感覺菌就是長不起來的樣子, 個人建議不要在這個地方偷工減料... 對了, 我以前做的菌是 Deinococcus. : : 這些問題看起來好像很笨>"< : : 真不好意思 : : 因為我找不到答案 又很想知道這些方法可不可行 : : 麻煩瞭解的人幫我回答一下 : : 或是提供網址or書籍供我參考 : : 非常感謝<(_ _)> -- CH2一CH2一CH一COO- | | Methionine (Met) S一CH3 +NH3 --

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