※ 引述《linzhengzhan (研究所：硕士班vs博士班)》之铭言： : ※ 引述《ici (南飞的意义)》之铭言： : : 问题一 : : 若是第一次养 plate上只有长一些些 : : 可以在flow里面 用loop直接将第一次长的菌拉开後 再送回incubator吗? : 视情况而定，如果已放超过16hr的话，不建议这样作，因为怕菌在长时间培养会有问题， : 也怕已长出的菌会太老，使活性降低……；如果放的时间不足16hr的话，就继续养吧…… : 建议： : 把少量的菌，先种至broth放大，再划plate存下来；E. coli在LB plate上只有 : 一个月的保存期限，每一个月要划一次菌…… : : 问题二 : : 若菌没有长 这个plate可以再使用吗? (接种同一菌株) : 不可以，怕会污染到之後要种的菌，所以最要是换一片plate，以确保安全…… : : 问题三 : : 4度C冷藏保存是为了pause cell cycle : : 那冷藏过的plate(或装有medium 的tube) 可以再送回incubator继续培养吗? : 在以前，有将plate放到4℃後，再拿出来养，是可以的，但是限少数情况，理由同问题一 : ；而装有medium的tube也是ok，但不要超过一天，因为菌的活性会降的很低，也限少数 : 情况…… 若冰过再拿出来养, 生长的速度一定会变慢, 但是没办法掌握他到底变得多慢, 若是在还没完全恢复活性的时候, 就做实验, 结果可能会非常怪异; 而且也不知道在冷藏的过程中, 会不会影响到菌的生理或什麽的... 如果因为短时间不做而冷藏起来, 以前我们实验室会要求, 拿出来後先接到装 medium 的 tube 里养一天, 再接到另一支 tube 里, 再养一天, 一定要接两次, 观察其生长回复正常之後, 才能开始做实验. 我曾经偷懒只接一次就做实验, 可能是活性真的没有恢复, 结果非常怪异, 感觉菌就是长不起来的样子, 个人建议不要在这个地方偷工减料... 对了, 我以前做的菌是 Deinococcus. : : 这些问题看起来好像很笨>"< : : 真不好意思 : : 因为我找不到答案 又很想知道这些方法可不可行 : : 麻烦了解的人帮我回答一下 : : 或是提供网址or书籍供我参考 : : 非常感谢<(_ _)> -- CH2一CH2一CH一COO- | | Methionine (Met) S一CH3 +NH3 --

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