作者ginmol (儲備博士)
看板Biotech
標題[問題] Western blot中標的蛋白位置老是不對.??
時間Fri Oct 13 21:22:05 2006
很奇怪的現象，不知道版上各位先進是否有人分析過phospho-beta-catenin?
我做完western之後發現，他的位置出現在60 KDa左右，
但根據抗體的data sheet，應該是在92 KDa的位置....
想請問大家是否有遇過類似情況？以及此現象可能是什麼原因造成的？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.48.158
1F：推 aggaci:Santzcruz的抗體? 10/13 21:25
2F：→ aggaci:打錯 是santacruz 10/13 21:26
3F：推 ginmol:不是，是cell signaling 10/13 22:53
4F：推 jbking:請問您的running buffer system為何 10/13 23:58
5F：推 FromWood:這張膜有沒有試過其他的蛋白 例如actin等 位置正確嗎^^ 10/14 11:43
6F：→ FromWood:其實我覺得很多抗體都會認到很多non-specific的東西 10/14 11:44
7F：→ FromWood:您可以想辦法看有沒有positive control做對照 10/14 11:44
8F：→ FromWood:例如看看beta-catenin的位置 是不是也在同樣的地方 10/14 11:46
9F：→ FromWood:才比較能確定你看到的band究竟是不是你要看的 10/14 11:47