作者ginmol (储备博士)
看板Biotech
标题[问题] Western blot中标的蛋白位置老是不对.??
时间Fri Oct 13 21:22:05 2006
很奇怪的现象，不知道版上各位先进是否有人分析过phospho-beta-catenin?
我做完western之後发现，他的位置出现在60 KDa左右，
但根据抗体的data sheet，应该是在92 KDa的位置....
想请问大家是否有遇过类似情况？以及此现象可能是什麽原因造成的？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.48.158
1F：推 aggaci:Santzcruz的抗体? 10/13 21:25
2F：→ aggaci:打错 是santacruz 10/13 21:26
3F：推 ginmol:不是，是cell signaling 10/13 22:53
4F：推 jbking:请问您的running buffer system为何 10/13 23:58
5F：推 FromWood:这张膜有没有试过其他的蛋白 例如actin等 位置正确吗^^ 10/14 11:43
6F：→ FromWood:其实我觉得很多抗体都会认到很多non-specific的东西 10/14 11:44
7F：→ FromWood:您可以想办法看有没有positive control做对照 10/14 11:44
8F：→ FromWood:例如看看beta-catenin的位置 是不是也在同样的地方 10/14 11:46
9F：→ FromWood:才比较能确定你看到的band究竟是不是你要看的 10/14 11:47