※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之銘言： : 我想請問有在做真菌培養再萃取其代謝物質的大大們 : 是否有過將真菌培養一段時間後 : 跑HPLC來確定裡面的代謝物質種類 : 卻發現原本存在的物質反而不見了@@ : 是否是因為真菌的活性降低了呢? : 是因為我ㄧ直將其繼代培養的關係嗎?? : 此時是否應該重新從原始plate上活化呢? : THX^^ 菌或細胞在每一次生長分裂時都會老化，或是突變，最終造成細胞的生理或代謝活性 產生變化。 我想最好的方式就是一拿到細胞，菌株時先大量培養到細胞生長穩定，然後將細胞或 菌株分管編號凍起來起來，這就是細胞庫(cell bank)。 要養細胞時，取出一管培養，我的習慣是會將此管細胞大量培養一部分作幾代的培養 實驗一部分再標號凍起起來，成為二級細胞庫。 這樣的做法可以確保細胞株的特性較接近原始細胞株特性，養個幾代實驗後再解凍我 的二級細胞庫，因為二級細胞庫的細胞都是來自於同一次細胞培養，所以特性會相同。 圖示： 原始細胞株：經培養分別凍成數管，剩下的作實驗，幾代後丟棄 P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10... 剩下的作實驗，幾代後丟棄。要再作實驗時，將P1解凍培養分別凍成數管，剩下的作實 驗，幾代後丟棄。 二級細胞庫：P1-1 P1-2 P1-3 P1-4..... 等到P1二級細胞庫用完，再解凍P2重複上述動作。 作實驗那麼多年，看到有許多人一株細胞養了好幾代，代數都超過細胞株來源建議的 代數。 -- 織田信長：「杜鵑不叫，我殺了牠！」 豐臣秀吉：「杜鵑不叫，我想辦法讓牠叫！」 德川家康：「杜鵑不叫，我等牠叫！」 Angus Tzeng：「杜鵑不叫，我自己叫！XD」 --

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