※ 引述《mikis1107 (mikis1107)》之铭言： : 我想请问有在做真菌培养再萃取其代谢物质的大大们 : 是否有过将真菌培养一段时间後 : 跑HPLC来确定里面的代谢物质种类 : 却发现原本存在的物质反而不见了@@ : 是否是因为真菌的活性降低了呢? : 是因为我ㄧ直将其继代培养的关系吗?? : 此时是否应该重新从原始plate上活化呢? : THX^^ 菌或细胞在每一次生长分裂时都会老化，或是突变，最终造成细胞的生理或代谢活性 产生变化。 我想最好的方式就是一拿到细胞，菌株时先大量培养到细胞生长稳定，然後将细胞或 菌株分管编号冻起来起来，这就是细胞库(cell bank)。 要养细胞时，取出一管培养，我的习惯是会将此管细胞大量培养一部分作几代的培养 实验一部分再标号冻起起来，成为二级细胞库。 这样的做法可以确保细胞株的特性较接近原始细胞株特性，养个几代实验後再解冻我 的二级细胞库，因为二级细胞库的细胞都是来自於同一次细胞培养，所以特性会相同。 图示： 原始细胞株：经培养分别冻成数管，剩下的作实验，几代後丢弃 P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P10... 剩下的作实验，几代後丢弃。要再作实验时，将P1解冻培养分别冻成数管，剩下的作实 验，几代後丢弃。 二级细胞库：P1-1 P1-2 P1-3 P1-4..... 等到P1二级细胞库用完，再解冻P2重复上述动作。 作实验那麽多年，看到有许多人一株细胞养了好几代，代数都超过细胞株来源建议的 代数。 -- 织田信长：「杜鹃不叫，我杀了牠！」 丰臣秀吉：「杜鹃不叫，我想办法让牠叫！」 德川家康：「杜鹃不叫，我等牠叫！」 Angus Tzeng：「杜鹃不叫，我自己叫！XD」 --

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