作者qivze (菌元體)
看板Biotech
標題[問題] 問關SDS-PAGE的問題?(about BME)
時間Sat Oct 21 10:36:47 2006
請問一下各位高人一問題:
狀況一:純化的目標蛋白為單元體時(假設120kDa)
狀況一:純化的目標蛋白為多元體時(假設120kDa含2個60kDa)
Q1.跑SDS PAGE 時於sample中加入DTT或mercaptoethanol 作用為打斷雙硫鍵...,
是否仍要加熱(煮5min)...加不加熱有何差別?
Q2.承Q1..
sample中加入DTT或mercaptoethanol作用為打斷雙硫鍵....,
加熱僅是加速他的作用.....若作用完全之下可不加熱...這樣對嗎?
假如有一個實驗，是要看雙硫鍵的結合能力，那為了實驗目的，當然不能用BME來
處理，但是確要執行加熱95度 5min的動作，請問這樣雙硫鍵不會被破壞掉嗎?
真的很謝謝你們^^
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◆ From: 218.184.33.133
1F：推 Bluecold:加熱是為了破壞蛋白質形狀 10/21 13:41
2F：→ Bluecold:讓PAGE的變數只剩下分子量大小 10/21 13:42
3F：→ Bluecold:95度還不至於破壞雙硫鍵 10/21 13:43
4F：推 qivze:^^"十二萬分的感謝您... 10/21 13:51