作者qivze (菌元体)
看板Biotech
标题[问题] 问关SDS-PAGE的问题?(about BME)
时间Sat Oct 21 10:36:47 2006
请问一下各位高人一问题:
状况一:纯化的目标蛋白为单元体时(假设120kDa)
状况一:纯化的目标蛋白为多元体时(假设120kDa含2个60kDa)
Q1.跑SDS PAGE 时於sample中加入DTT或mercaptoethanol 作用为打断双硫键...,
是否仍要加热(煮5min)...加不加热有何差别?
Q2.承Q1..
sample中加入DTT或mercaptoethanol作用为打断双硫键....,
加热仅是加速他的作用.....若作用完全之下可不加热...这样对吗?
假如有一个实验，是要看双硫键的结合能力，那为了实验目的，当然不能用BME来
处理，但是确要执行加热95度 5min的动作，请问这样双硫键不会被破坏掉吗?
真的很谢谢你们^^
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◆ From: 218.184.33.133
1F：推 Bluecold:加热是为了破坏蛋白质形状 10/21 13:41
2F：→ Bluecold:让PAGE的变数只剩下分子量大小 10/21 13:42
3F：→ Bluecold:95度还不至於破坏双硫键 10/21 13:43
4F：推 qivze:^^"十二万分的感谢您... 10/21 13:51