作者wadewang (小龜)
看板Biotech
標題[求救] Cell seeding怎麼樣都不均勻.....
時間Fri Jan 25 19:37:53 2008
已經種到快發瘋了 看了之前的討論也沒有頭緒
現在的情況是種10cm dish和75T flask都沒問題
問題都出在3.5cm dish和 24well plate
seeding的方法是
3.5cm dish是先加入適量medium 然後將細胞液均勻滴在dish上 總體積約1ml
然後十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
24well plate則是將細胞稀釋到500ul的體積 然後均勻滴進去
然後一樣十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
下場就是細胞都聚在周圍
中間細胞都很少
到底應該怎麼搖才能均勻阿
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◆ From: 140.129.77.148
1F：推 tsubasawolfy:十字搖法的力道要自己抓 01/25 22:53
2F：→ tsubasawolfy:不過小孔的轉一下就好了吧 用搖的會集中在孔中 01/25 22:54
3F：推 missoul:小量的建議完全不搖 由邊緣均勻加入靜置即可 01/26 01:23
4F：推 sjm0626:打散細胞如果確實,混合均勻加入WELL裡,怎麼搖都OK 01/26 11:43
5F：推 soj:搖大力點 十字搖法 或卍字搖法 把細胞搖起來(顯微鏡觀察) 01/26 15:54
6F：→ soj:再讓它們平均沉降 01/26 15:55