作者wadewang (小龟)
看板Biotech
标题[求救] Cell seeding怎麽样都不均匀.....
时间Fri Jan 25 19:37:53 2008
已经种到快发疯了 看了之前的讨论也没有头绪
现在的情况是种10cm dish和75T flask都没问题
问题都出在3.5cm dish和 24well plate
seeding的方法是
3.5cm dish是先加入适量medium 然後将细胞液均匀滴在dish上 总体积约1ml
然後十字摇法,前後3次左右3次,重复3次 摇晃时间差约为1秒
24well plate则是将细胞稀释到500ul的体积 然後均匀滴进去
然後一样十字摇法,前後3次左右3次,重复3次 摇晃时间差约为1秒
下场就是细胞都聚在周围
中间细胞都很少
到底应该怎麽摇才能均匀阿
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◆ From: 140.129.77.148
1F:推 tsubasawolfy:十字摇法的力道要自己抓 01/25 22:53
2F:→ tsubasawolfy:不过小孔的转一下就好了吧 用摇的会集中在孔中 01/25 22:54
3F:推 missoul:小量的建议完全不摇 由边缘均匀加入静置即可 01/26 01:23
4F:推 sjm0626:打散细胞如果确实,混合均匀加入WELL里,怎麽摇都OK 01/26 11:43
5F:推 soj:摇大力点 十字摇法 或卍字摇法 把细胞摇起来(显微镜观察) 01/26 15:54
6F:→ soj:再让它们平均沉降 01/26 15:55