作者compaq (不是你)
看板Biotech
標題Re: [求救] Cell seeding怎麼樣都不均勻.....
時間Sat Jan 26 18:27:52 2008
※ 引述《wadewang (小龜)》之銘言：
: 已經種到快發瘋了 看了之前的討論也沒有頭緒
: 現在的情況是種10cm dish和75T flask都沒問題
: 問題都出在3.5cm dish和 24well plate
: seeding的方法是
: 3.5cm dish是先加入適量medium 然後將細胞液均勻滴在dish上 總體積約1ml
: 然後十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
: 24well plate則是將細胞稀釋到500ul的體積 然後均勻滴進去
: 然後一樣十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
: 下場就是細胞都聚在周圍
: 中間細胞都很少
我將細胞seeding在96 well的時候
也有遇過這樣的問題
那時候解決的方法是seeding完細胞之後放在室溫下約1hr
(這個方法是我同學看到別人的protocol後告訴我的)
之後我seeding完細胞都會放在操作台上1hr之後再放到incubator
你可以試試看seeding完之後放在室溫一下
但不建議像96 well一樣放一個小時
因為細胞反而會聚集在中間
希望對你有幫助
: 到底應該怎麼搖才能均勻阿
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