作者compaq (不是你)
看板Biotech
标题Re: [求救] Cell seeding怎麽样都不均匀.....
时间Sat Jan 26 18:27:52 2008
※ 引述《wadewang (小龟)》之铭言：
: 已经种到快发疯了 看了之前的讨论也没有头绪
: 现在的情况是种10cm dish和75T flask都没问题
: 问题都出在3.5cm dish和 24well plate
: seeding的方法是
: 3.5cm dish是先加入适量medium 然後将细胞液均匀滴在dish上 总体积约1ml
: 然後十字摇法，前後3次左右3次，重复3次 摇晃时间差约为1秒
: 24well plate则是将细胞稀释到500ul的体积 然後均匀滴进去
: 然後一样十字摇法，前後3次左右3次，重复3次 摇晃时间差约为1秒
: 下场就是细胞都聚在周围
: 中间细胞都很少
我将细胞seeding在96 well的时候
也有遇过这样的问题
那时候解决的方法是seeding完细胞之後放在室温下约1hr
(这个方法是我同学看到别人的protocol後告诉我的)
之後我seeding完细胞都会放在操作台上1hr之後再放到incubator
你可以试试看seeding完之後放在室温一下
但不建议像96 well一样放一个小时
因为细胞反而会聚集在中间
希望对你有帮助
: 到底应该怎麽摇才能均匀阿
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