作者jl4944 (白毛)
看板Biotech
標題[求救]有關CELL VIABILITY的實驗
時間Fri Feb 15 23:19:05 2008
目前我的實驗是在做小腦萎縮症第八型(SCA8)
我想建立一個CELL MODEL也就是找出SCA8的細胞phenotype
我有三個細胞株:HT(正常人),23R(帶原者),157R(病人)
照理說157R的死亡率應該明顯得比較高
我第一個實驗是FLOW 藉以觀察細胞週期的變化
藉由STS(STAROUSPORINE)來誘導細胞凋亡
但是STS使整個細胞週期變得很亂 所以就改方法
第二個實驗 是用最基本的Trypan blue assay
HT 23R 157R 交叉STS四種濃度(0 15 30 50)
但是卻一樣沒有結果
有幾次DATA還顯示157R配上最濃的STS細胞死亡率還比較低
所以真得是非常得令人困惑
懇請各位大大幫我想想有哪裡出問題了
我列一些在Trypan blue assay也許的問題點
1.從MEDIUM就可以看出來157R吸收較多的養分 長得比較快
但是再計算細胞時卻沒較多 而且越後面還有打不散的情況
2.要將細胞打起來計算時 我是先全部先打起來 那是不是
要算的時候再打起來(打一孔算一孔)會比較好
並且 我只用原本的MEDIUM沖而已 是否需要改善
3.STS是否適合誘導 有其他藥劑較合適嗎?
拜託各位大大幫小的解惑 如有看不懂的地方可以指出
感激不盡
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.166.41.150
1F：推 artichoke:我個人是有在用camptothecin誘導pulmonary macrophage 02/17 22:06
2F：→ artichoke:結果還可以，我也是用FLOW偵測，我是用Annexin V-PI染劑 02/17 22:07
3F：→ artichoke:至於trypan blue的方法我也有試過，但我比較喜歡用flow 02/17 22:07