作者jl4944 (白毛)
看板Biotech
标题[求救]有关CELL VIABILITY的实验
时间Fri Feb 15 23:19:05 2008
目前我的实验是在做小脑萎缩症第八型(SCA8)
我想建立一个CELL MODEL也就是找出SCA8的细胞phenotype
我有三个细胞株:HT(正常人),23R(带原者),157R(病人)
照理说157R的死亡率应该明显得比较高
我第一个实验是FLOW 藉以观察细胞周期的变化
藉由STS(STAROUSPORINE)来诱导细胞凋亡
但是STS使整个细胞周期变得很乱 所以就改方法
第二个实验 是用最基本的Trypan blue assay
HT 23R 157R 交叉STS四种浓度(0 15 30 50)
但是却一样没有结果
有几次DATA还显示157R配上最浓的STS细胞死亡率还比较低
所以真得是非常得令人困惑
恳请各位大大帮我想想有哪里出问题了
我列一些在Trypan blue assay也许的问题点
1.从MEDIUM就可以看出来157R吸收较多的养分 长得比较快
但是再计算细胞时却没较多 而且越後面还有打不散的情况
2.要将细胞打起来计算时 我是先全部先打起来 那是不是
要算的时候再打起来(打一孔算一孔)会比较好
并且 我只用原本的MEDIUM冲而已 是否需要改善
3.STS是否适合诱导 有其他药剂较合适吗?
拜托各位大大帮小的解惑 如有看不懂的地方可以指出
感激不尽
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◆ From: 218.166.41.150
1F：推 artichoke:我个人是有在用camptothecin诱导pulmonary macrophage 02/17 22:06
2F：→ artichoke:结果还可以，我也是用FLOW侦测，我是用Annexin V-PI染剂 02/17 22:07
3F：→ artichoke:至於trypan blue的方法我也有试过，但我比较喜欢用flow 02/17 22:07