作者artichoke (summerblue)
看板Biotech
標題Re: [討論] lysis buffer加下後有需要等半小時嗎？
時間Tue Feb 19 21:24:48 2008
※ 引述《LIAR (墮天使)》之銘言：
: 嗯...我們實驗室是做neuron的，加lysis buffer後會冰上或冰箱等個30 min再刮
: 下定量，不過我生化的老師認為沒這個必要，一加就可以直接嚕，而且buffer量不用多，
: 只要刮刀有經過就好，不放心的話收集後冰上泡10 min也就算完全反應.....
: 我比較認同老師的想法，不過想多請教一下意見，如果真的一加就直接刮，我就要
: 把protocol修正一下了。
: =====
: 另外請問一個問題，如果要刮的dish很多，但刮刀不夠多，請問刮刀要怎麼重複用
: 而不會交互污染？
正好我今天也在使用lysis buffer，所以手癢來回覆一下您的文章。
我是做pulmonary alveolar macrophage的。
我培養在35mm plate上，
加的lysis buffer量是100μl
放在冰上，大概左右搖晃20-30秒後，
用cell lifter(即刮刀)，完全的刮下來。
最後，
我是兩枝cell lifter輪流交替使用。
我把它們泡在內含400ml sDW的1000ml大燒杯內，輪流使用。
據本實驗室眾多學長姐的經驗，是沒有交互污染的問題存在。
以上，僅供您參考。
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1F：推 LIAR:請問sDW全名是什麼？ 02/19 21:27
2F：→ artichoke:sterile distilled water 02/19 22:02
3F：推 tincta:我們家是以75% EtoH噴洗之後拭乾再用 03/08 00:36
4F：→ tincta:我是說刮刀 ^^ 03/08 00:37